Gram-négative

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Gram-négative

Gram négatif

Les bactéries à Gram négatif sont mises en évidence par une technique de coloration appelée coloration de Gram. Les bactéries à Gram négatif apparaissent alors roses au microscope. La technique de coloration repose sur les caractéristiques membranaires et de paroi de la bactérie. La coloration de Gram est un facteur déterminant dans la taxonomie (classification) bactérienne.

Des bactéries Gram - (Escherichia coli)

Sommaire

Principe de coloration des Gram négatif

Apr√®s fixation des bact√©ries sur une lame (deux m√©thodes possibles : fixation √† l'√©thanol √† 90¬į (5 minutes) ou par passage de la lame dans la flamme, dite frottis) :

  • La lame est plong√©e dans un premier colorant : le violet de gentiane (1 minute). Le violet de gentiane est un colorant puissant, (toxique et canc√©rig√®ne). Il va traverser les parois et membranes des bact√©ries et se fixer dans leurs cytoplasmes. Ainsi √† cette √©tape toutes les cellules sont color√©es en violet.
  • La lame est ensuite trait√©e au lugol (diiode) en solution qui sert de mordant (30 secondes) : il va renforcer le violet de gentiane contenu dans le cytoplasme des bact√©ries.
  • On chasse ensuite le violet avec une solution d'√©thanol √† 90¬į. Cette √©tape est cruciale car permet de discriminer les bact√©riesGram n√©gatif des bact√©ries Gram positif. Le principe est le suivant : les bact√©ries Gram n√©gatif poss√®dent une paroi pauvre en peptidoglycane, composant qui en raison de sa faible quantit√© va permettre √† l'alcool d'emporter le violet de gentiane, celui-ci disparaissant du cytoplasme. La bact√©rie est donc d√©color√©e (pour plus d'information, voir les caract√©ristiques des bact√©ries Gram n√©gatif).
  • La lame, apr√®s avoir √©t√© rinc√©e, est plong√©e bri√®vement dans un deuxi√®me colorant, la fuchsine (1 minute). Ce colorant traverse toutes les parois et membranes et va colorer en rose toutes les bact√©ries qui ont √©t√© d√©color√©es durant l'√©tape pr√©c√©dente ; les bact√©ries Gram positif √©tant color√©es en violet (plus sombre) n'appara√ģtront pas rose (plus clair).

La lame est ensuite r√©cup√©r√©e, rinc√©e et s√©ch√©e, puis observ√©e au microscope optique g√©n√©ralement √† l'objectif x100 + huile √† immersion. Les bact√©ries Gram n√©gatif appara√ģtront en rose. L'observation de leur couleur est g√©n√©ralement accompagn√©e de descriptions structurelles (ex. bacille ou coque).

Caractéristiques des bactéries Gram négatif

Description de l'enveloppe

Les bact√©ries Gram n√©gatif ont une structure qui s'organise en trois grandes parties, soit, de l'ext√©rieur vers l'int√©rieur, :

  • La membrane externe,
  • L'espace p√©riplasmique, comportant notamment la paroi,
  • La membrane plasmique.

La membrane externe est en contact direct avec le milieu ext√©rieur. Elle est principalement compos√©e de phospholipides organis√©s en bicouche (partie hydrophile √† l'ext√©rieur et partie lipophile √† l'int√©rieur) mais contient aussi de nombreuses prot√©ines intrins√®ques, notamment les prot√©ines de transports appel√©es porines. Beaucoup de bact√©ries Gram n√©gatif (par exemple Salmonella) poss√®dent aussi un compos√© non protidique appel√© lipopolysaccharide ou LPS ; ce compos√© peu immunog√®ne, dont le pouvoir pathog√®ne (lipide A) est inclus dans la membrane externe, s'active lors de la lyse de la bact√©rie. La membrane externe est reli√©e au peptidoglycane par la lipoprot√©ine de Braun.

L'espace périplasmique est un espace de stockage d'enzymes, de nutriments... Il a beaucoup d'autres fonctions, notamment dans certaines étapes de la synthèse des protéines et dans le métabolisme. Il se situe entre la membrane externe et la membrane plasmique et il contient une couche de peptidoglycanes. La couche de peptidoglycane (appelé aussi muréine) est relativement mince chez les Gram négatif contrairement aux Gram positif.

La membrane plasmique est semblable √† la membrane externe (except√© le LPS). Elle poss√®de des prot√©ines poreuses aboutissant dans l'espace p√©riplasmique (synth√®se des prot√©ines). La membrane plasmique contient de nombreux autres complexes prot√©iques d'une importance vitale pour la bact√©rie (comme l'ATP synthase) qui ont des r√īles pr√©pond√©rants dans le m√©tabolisme bact√©rien.

Exemples de bactéries Gram négatif

Voir aussi

  • Les mycobact√©ries : une exception car non colorable par la m√©thode de Gram car acido-alcoolo-r√©sistantes.
Voir coloration de Ziehl-Neelsen.
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Regardez d'autres dictionnaires:

  • Gram-negative ‚ÄĒ bacteria lose the crystal violet stain (and take the color of the red counterstain) in Gram s method of staining. This is characteristic of bacteria that have a cell wall composed of a thin layer of a particular substance (called peptidoglycan).… ‚Ķ   Medical dictionary

  • Gram-negative ‚ÄĒ [gram‚Ä≤neg‚Ä≤…ô tiv] adj. [also g ] designating bacteria that do not retain the color stain: see GRAM S METHOD ‚Ķ   English World dictionary

  • Gram-negative ‚ÄĒ Bacillus cereus, lichtmikroskopisch, Gram F√§rbung: grampositiv Pseudomonas aeruginosa, lichtmikroskopisch, Gram F√§ ‚Ķ   Deutsch Wikipedia

  • Gram-negative ‚ÄĒ /gram neg euh tiv/, adj. (often l.c.) (of bacteria) not retaining the violet dye when stained by Gram s method. [1905 10; see GRAM S METHOD] * * * ‚Ķ   Universalium

  • Gram-negative ‚ÄĒ Gram‚Ä≤ neg‚Ä≤ative [[t]gr√¶m[/t]] adj. (often l.c.) mcr lab (of bacteria) not retaining the violet dye when stained by Gram s method ‚ÄĘ Etymology: 1905‚Äď10 ‚Ķ   From formal English to slang

  • Gram-negative ‚ÄĒ adjective (of bacteria) being of or relating to a bacterium that does not retain the violet stain used in Gram s method ‚ÄĘ Similar to: ‚ÜĎnegative, ‚ÜĎdisconfirming ‚ÄĘ Topics: ‚ÜĎbacteria, ‚ÜĎbacterium ‚Ķ   Useful english dictionary

  • gram-negative ‚ÄĒ adjective Date: 1907 not holding the purple dye when stained by Gram s stain used chiefly of bacteria ‚Ķ   New Collegiate Dictionary

  • gram-negative ‚ÄĒ adjective (of a bacterium) that is not stained violet by Grams method Ant: gram positive ‚Ķ   Wiktionary

  • gram-negative ‚ÄĒ (about bacteria) not retaining the primary violet stain after being stained by Gram s method ‚Ķ   English contemporary dictionary

  • Gram-negative ‚ÄĒ adjective see Gram stain ‚Ķ   English new terms dictionary


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