Proteine fluorescente verte

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Proteine fluorescente verte

Protéine fluorescente verte

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La prot√©ine fluorescente verte (souvent abr√©g√© GFP, de l'anglais ¬ę Green Fluorescent Protein ¬Ľ) est une prot√©ine ayant la propri√©t√© d'√©mettre une fluorescence de couleur verte. Issue d'une m√©duse (Aequorea victoria), cette prot√©ine est intrins√®quement fluorescente. Son g√®ne peut √™tre fusionn√© in-vitro au g√®ne d'une prot√©ine que l'on souhaite √©tudier. Le g√®ne recombinant est ensuite r√©introduit dans des cellules ou un embryon, qui va alors synth√©tiser la prot√©ine de fusion, alors fluorescente. On pourra alors l'observer √† l'aide d'un microscope √† fluorescence, par exemple. Cette m√©thode permet d'√©tudier les prot√©ines dans leur environnement naturel : la cellule vivante. La d√©couverte et les applications de la GFP ont √©t√© couronn√©es par le prix Nobel de chimie d√©cern√© √† Osamu Shimomura, Martin Chalfie et Roger Tsien le 8 octobre 2008[1][2].

Sommaire

Structure de la GFP

Structure de la GFP.
Protéine GFP

La GFP a √©t√© d√©crite pour la premi√®re fois en 1962. Elle est constitu√©e de 238 acides amin√©s. Le chromophore (centre actif responsable de la fluorescence) est constitu√© par les cha√ģnes lat√©rales d'une glycine, une tyrosine et une s√©rine.
La GFP non modifi√©e, dite sauvage (wild type : wGFP) a deux maxima d'excitation. Le premier se trouve avec une longueur d'onde de 395 nm (lumi√®re UV), le deuxi√®me √† 475 nm (lumi√®re bleue). La longueur d'onde d'√©mission maximale est √† 504 nm. Elle est √©galement photoexcitable, ce qui signifie que l'intensit√© de la fluorescence √©mise est intensifi√©e par une exposition √† des photons ultraviolets, caract√©ristique perdue dans la plupart des variants produits par la suite.

Il existe maintenant diff√©rentes variantes de la GFP qui ont √©t√© obtenues en modifiant celle-ci par ing√©nierie g√©n√©tique. Il existe √©galement d'autre prot√©ines fluorescentes issues d'autre organismes que A. Victoria :

  • eGFP : fluorescence verte ("enhanced GFP")
  • eCFP : fluorescence cyan (bleu-vert), et son variant Cerulean
  • eYFP : fluorescence jaune (Y pour yellow), et ses variants Venus et Citrine.
  • eBFP : "Blue fluorescent protein" et un variant : l'Azurite.
  • PA-GFP : GFP photoactivable √† 405 nm
  • PHluorin : GFP sensible au pH, s'√©teint √† pH acide.

Il a √©t√© montr√© que la GFP fusionn√©e √† une prot√©ine peut aider le repliement de cette derni√®re lors de son expression g√©n√©tique.[r√©f. n√©cessaire]

Autres protéines fluorescentes

  • DsRed : fluorescence rouge, issue d'un corail, du genre Discosoma. Est √† l'origine d'une seconde famille de variants dans la gamme orange-rouge.
  • Keima : fluorescence rouge avec excitation dans le bleu (d√©placement de Stockes important)

Sources et références

  • Nature Biotechnology - 24, 1569 - 1571 (2006)
  • Nature Biotechnology 24, 577 - 581 (2006)
  • Nature Biotechnology 22, 1524 - 1525 (2004)

Voir aussi

Articles connexes

  • GloFish, une marque d√©pos√©e de poisson z√®bre g√©n√©tiquement modifi√© par l'introduction dans son g√©nome d'un g√®ne d'une prot√©ine fluorescente conf√©rant des couleurs rouge, vert et orange clair.
  • Eduardo Kac, un artiste utilisant la GFP pour ses Ňďuvres de BioArt.

Liens externes

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